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三種消毒劑檢測方法分析對比

發布時間： 2018-10-22　　點擊次數： 3083次

　　三種消毒劑檢測方法分析對比
　　對三種消毒劑檢測方法戊二醛溶液，二氯異氰尿酸鈉溶液系滅枯草桿菌黑色變種芽孢的效果進行了比較。結果，用歐洲標準懸液定量殺菌試驗．改良歐洲懸液定量殺菌試驗和載體浸泡定量殺菌試驗檢測含戊二醛2％ (g／m1)溶液殺滅枯草桿菌黑色變種芽化達消毒合格標準，作用時間分別為2.5．3.0，2.0 h。用前兩方法檢測含有效氯4 500 mg／L的二氯異氰尿酸鈉溶液及用載體方法檢測含有效氯l 000 mg／L該液殺滅枯草桿菌黑色變種芽孢達消毒合格標準，作用時間分別為30，20．10 min。當染菌片的芽孢懸液中增含小牛血清50%(ml／m1)時，用載體方法檢測含有效氯5 000 mg／L的二氯異氰尿酸鈉溶液殺滅該芽孢達消毒合格標準，作用時間近20 min，與用歐洲標準懸液法檢測者（30 min)相近表明三種方法檢測受有機物影響較小的戊二醛殺菌效果相差較小，檢測受有機物影響較大的二氯異氰尿酸鈉殺菌效果相差較大。后者可能與方法中含有機物多少有關。
　　消毒劑檢測方法
　　1、消毒劑檢測菌懸液與菌片的制備
　　在歐洲標準懸液法和改良歐洲懸液法中，用含胰蛋白胨0，1％ (g／m1) 和氯化鈉0，85％ (g／m1) 的去離子水溶液(pH6 8～7 0)，將枯草桿菌黑色變種(ATCC9372）芽孢稀釋至規定含菌量的懸液。在載體法中，用含蛋白胨0．1％ (g／m1)的磷酸鹽緩沖液(PBS， pH 7．2～7，4)制成的枯草桿菌黑色變種芽孢懸液滴染1，0 cm×1，0 cm 布片，制成菌片。
　　2、消毒劑檢測中和劑選擇試驗
　　因懸液法中和劑選擇試驗結果可適用于載體試驗中，故試驗用歐洲標準懸液法進行。試驗設6組，第l組到第5組，皆將0．5 ml含牛血清白蛋白(SIGMA公司產) 3％ (g／m1) 的去離子水溶液(過濾除菌后使用) 加入無菌試管中，再加0，5 ml枯草桿菌黑色變種芽孢懸液，混勻。然后，第l、2組均加入4．0 ml消毒劑溶液(用標準硬水配制)，作用至預定時間，第l組吸取0，5 ml加到含有4．5 ml PBS的試管中，第2組吸取0，5 ml加到含有4 5 ml中和劑溶液的試管中；第3組加入4．0 ml中和劑溶液，作用預定時間，吸取0、5 ml加到含有4，5 ml中和劑溶液的試管中；第4組加入4．0 ml中和產物(1份消毒劑溶液加4份中和劑溶液，中和作用l0 min) 溶液，作用至預定時間，吸取0．5 ml加到含有4．5ml中和產物溶液的試管中：第5組加入4．0ml PBS，作用至預定時間，吸取0．5 ml加到含有4．5 ml PBS的試管中。第6組為中和劑溶液、中和產物溶液和胰蛋白胨大豆蛋白胨培養基(TSA)陰性對照。試驗結果，以第l組不長菌或長菌量遠低于第2組，第2組長菌量不低于l00 cfu／ml，第3、4、5組長菌量達5．0×l0 ～5．0×l0。cfu／ml且組間菌數相差不超過l0％，第6組不長菌，為所選中和劑合適。
　　3、消毒劑檢測定量殺菌試驗
　　歐洲標準懸液定量殺菌試驗向試管內加入0．5 ml含牛血清白蛋白3％(g／m1) 的去離子水溶液和0．5 ml枯草桿菌黑色變種芽孢懸液，混勻，再加入4．0 ml消毒劑溶液(陽性對照組為無菌蒸餾水)，混勻并立即記時。作用至規定時間，取0．5ml混懸液，加于4．5 ml中和劑溶液中，混勻。中和作用l0 min，取0．5 ml該液或其稀釋液接種無菌平皿，一式兩份。傾注l8～ 20 ml TSA 培養基，混勻。置(37±1)℃培養72 h，計數菌落數，計算殺滅率。

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